摘要：槲皮素，又名栎精，槲皮黃素，溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。可(kě)作為(wèi)藥品，具有(yǒu)較好的(de)祛痰、止咳作用，并有(yǒu)一(yī)定的(de)平喘作用。

      目的(de)建立餘甘子(zǐ)藥材中槲皮素含量測定的(de)方法。方法HPLC法測定槲皮素含量。色譜柱為(wèi)SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm），保護柱為(wèi)大連中彙達C18，流動相：甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1，檢測波長(cháng)373nm。結果進樣量在0.02～0.20μg範圍內(nèi)與色譜峰的(de)峰面積呈良好的(de)線性關系（r=0.9997），餘甘子(zǐ)藥材平均加樣回收率為(wèi)97.3%，RSD為(wèi)0.99%（n=6）。結論該方法操作簡便、快速，有(yǒu)良好的(de)精密度和(hé)準确性，可(kě)用于餘甘子(zǐ)藥材的(de)質量控制。

      「關鍵詞」餘甘子(zǐ)；槲皮素；液相色譜法AbstractObjectiveToestablishamethodfordeterminationofthecontentofquercetininPhyllanthusemblicaL..MethodsQuercetinwasquantitativelydeterminedbyhighperformanceliquidchromagraphy（HPLC）。WithSHIMADZUVP-ODS（5μm，4.6mm×250mm）column，amixtureofmethanoland0.4％H3PO4（with2.4g·L-1C7H15SO3Na）（50∶50）wasusedasphase，theflowratewas1ml·min-1andUVdetectionwavelengthwasat373nm。ResultsThelinearrelationshipwasgoodwithintherangeof0.02～0.20μg（r=0.9997）。TheaveragerecoveryofChinesemedicinalplantPhyllanthuswas97.3%andtherelativestandarddeviationwasbelow0.99%（n=6）。ConclusionThemethodisfast，simple，accurateandreproducibleandcanbeusedforthequalitycontrolofPhyllanthusemblicaL.KeywordsPhyllanthusemblicaL.；Quercetin；HPLC餘甘子(zǐ)為(wèi)大戟科(kē)葉下珠屬（Phyllanthus）植物餘甘子(zǐ)PhyllanthusemblicaL.的(de)幹燥成熟果實。《雲南省藥品标準》《藏藥标準》《中國(guó)藥典》均收載。别稱滇橄榄、橄榄、油甘子(zǐ)、望果；藏藥稱“久如(rú)拉”，傣藥稱“麻項幫”；古印度梵語稱“庵摩勒”。在雲南地(dì)區常作橄榄使用，還是藏族習用藥材。味酸、甘、澀，主要用于治療胃痛、腸炎、黃疸型肝炎、淋巴結核、高(gāo)血壓病等。研究表明餘甘子(zǐ)具有(yǒu)抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等作用［1］。餘甘子(zǐ)主要含沒食子(zǐ)酸（Gallicacid）；鞣花酸（Ellagicacid）；1-O-沒食子(zǐ)酰基-β-D葡萄糖；3，6-二-O-沒食子(zǐ)酰基-D-葡萄糖；诃子(zǐ)酸（Chebulinicacid）；槲皮素（Quercetin）；诃黎勒酸（Chcbtllagicacid）；鞣料雲實精（Corilagin）；3-乙基沒食子(zǐ)酸（3-ethoxy-4，5-dihydroxy-benzoicacid）等，其中槲皮素主要以槲皮苷的(de)形式存在。餘甘子(zǐ)還含有(yǒu)大量維生素C（1.0%～1.8%），且含量穩定［2］。本實驗采用液相色譜法測定餘甘子(zǐ)藥材中槲皮素的(de)含量。

      1儀器與試藥島津LC-20AT液相色譜儀、SPD-20A紫外檢測器、CBM-102色譜數據處理(lǐ)機(jī)；槲皮素對照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，甲醇、庚烷磺酸鈉為(wèi)色譜純，其它試劑均為(wèi)分析純，水為(wèi)純淨水。

      餘甘子(zǐ)藥材産地(dì)為(wèi)雲南省新平縣平甸鄉，春季采收幹燥。經作者鑒定為(wèi)大戟科(kē)葉下珠屬植物餘甘子(zǐ)PhyllanthusemblicaL.的(de)果實。

      2方法與結果2.1色譜條件SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm）色譜柱，大連中彙達C18保護柱，甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1；柱箱溫度35℃，紫外檢測波長(cháng)373nm，在上述條件下，樣品中槲皮素與其它峰分離(lí)度大于2.0，理(lǐ)論塔闆數達10000以上，槲皮素峰拖尾因子(zǐ)在1.05～1.18之間，且樣品中其它組分色譜峰無幹擾，見圖1。

      2.2對照品溶液的(de)制備取槲皮素對照品适量，精密稱定，用甲醇溶解，制成含槲皮素0.010mg·ml-1的(de)對照品溶液。

      2.3供試品溶液制備取餘甘子(zǐ)粉末（過40目篩）約5g，精密稱定，加入250ml甲醇，加熱回流1.5h，回收甲醇，殘渣精密加入甲醇-5%鹽酸溶液（4∶1）的(de)混合液25ml，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的(de)重量，搖勻，濾過，取續濾液，過0.45μm濾膜［3，4］，即得。

      2.4标準曲線與線性範圍精密吸取槲皮素對照品溶液2，4，6，10，14，20μl進樣測定，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積為(wèi)縱坐标，進樣質量數（μg）為(wèi)橫坐标，進行(xíng)線性回歸計算，得回歸方程：Y=53819X-45028（r=0.9997），在0.02～0.20μg範圍內(nèi)槲皮素有(yǒu)良好的(de)線性關系。

      2.5精密度實驗精密吸取槲皮素對照品溶液10μl，連續進樣6次，記錄色譜圖，槲皮素保留時間tR=15.512，其峰面積相對标準偏差RSD值為(wèi)0.97%（n=6）。

      2.6重複性實驗分别取同一(yī)批餘甘子(zǐ)藥材按“2.3”項下方法制備供試品溶液5份，進樣，記錄色譜圖，計算結果，藥材中槲皮素含量的(de)平均值為(wèi)0.563g，RSD值為(wèi)0.89％。

      2.7供試品溶液的(de)穩定性實驗取同一(yī)份餘甘子(zǐ)藥材供試品溶液，室溫下，分别于0，2，6，10，14，18，24h，進樣7次，記錄色譜圖，其峰面積相對标準偏差RSD值為(wèi)1.07%（n=7）。實驗結果表明供試品溶液在24h內(nèi)穩定。

      2.8加樣回收率實驗取已知含量的(de)餘甘子(zǐ)粉末6份，每份5g，精密稱定，分别精密加入槲皮索對照品溶液（0.010mg/ml）16ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣10μl，記錄色譜圖，結果餘甘子(zǐ)的(de)加樣回收率為(wèi)97.3%，RSD值為(wèi)0.99%（n=6）。結果見表1。表1槲皮素加樣回收率結果（略）

      2.9樣品的(de)測定稱取餘甘子(zǐ)藥材5g，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下分别進樣10μl，作者采收的(de)雲南省新平縣的(de)餘甘子(zǐ)藥材中槲皮素含量為(wèi)0.056mg·g-1（n=2），成都荷花池藥材市(shì)場購買的(de)川産餘甘子(zǐ)藥材中槲皮素含量為(wèi)0.086mg·g-1（n=2）。結果見表2。

      3讨論3.1流動相的(de)考察曾考察過甲醇－水-磷酸（50∶50∶0.2）［5］，乙腈-水（36∶64），（40∶60），乙腈-0.4%磷酸（55∶45），（50∶50），（36∶64），甲醇－0.4%磷酸（40∶60），（45∶55），（50∶50）［3］。以甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統對待測成分的(de)分離(lí)效果較好。且加入庚烷磺酸鈉在甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統下以每升流動相內(nèi)含1.2g時對峰形的(de)改善效果達到*值。表2餘甘子(zǐ)中槲皮素含量測定結果（略）

      3.2檢測波長(cháng)的(de)确定在190～500nm波長(cháng)範圍內(nèi)進行(xíng)紫外檢測，槲皮素在373nm波長(cháng)處有(yǒu)zui大吸收，在此波長(cháng)處供試液中槲皮素與其他組分色譜峰得到較好分離(lí)。

      3.3樣品測定前的(de)處理(lǐ)餘甘子(zǐ)粉末極易吸濕，稱量前可(kě)在60℃下幹燥，經比較槲皮素未損失。《中國(guó)藥典》2005年(nián)版對餘甘子(zǐ)藥材去(qù)核與否未作規定，實驗所用的(de)荷花池所售餘甘子(zǐ)為(wèi)去(qù)核的(de)，而雲南采集的(de)餘甘子(zǐ)并未做(zuò)去(qù)核處理(lǐ)，結果顯示四川産餘甘子(zǐ)比雲南産餘甘子(zǐ)所測槲皮素含量高(gāo)近1.5倍，且在槲皮素峰後多一(yī)小峰，可(kě)能與餘甘子(zǐ)果核與餘甘子(zǐ)果肉中槲皮素含量和(hé)化學(xué)成分組成的(de)差異有(yǒu)關。

      本實驗采用液相色譜法對餘甘子(zǐ)中槲皮素的(de)含量進行(xíng)測定，具有(yǒu)快速、簡便、良好的(de)精密度和(hé)準确性等優點，适用于餘甘子(zǐ)藥材的(de)質量控制。